OTRZYMYWANIE EOZYNY
RÓWNANIE REAKCJI:
OPIS:
– Eozynę otrzymuje się z fluoresceiny przez bromowanie.
– W czasie reakcji następuje substytucja (zastąpienie) czterech atomów wodoru w pierścieniach aromatycznych atomami bromu.
– Na skutek takiego przekształcenia otrzymuje się związek o bardziej intensywnym zabarwieniu niż substrat, czyli fluoresceina – mówimy, że atomy bromu spełniają funkcję grup auksochromowych, tzn. pogłębiających barwę.
– Podstawowym zastosowaniem eozyny jest barwienie preparatów w hematologii.
– Eozyna jest słabo rozpuszczalna w wodzie, poniżej 0,1 % (20 oC); znacznie lepiej w wodzie rozpuszcza się jej sól sodowa, w którą eozyne jest łatwo przeprowadzić.
– Eozyna, której syntezę tu prezentuję, jest znana jako „eozyna Y”, która jest tetrabromopochodną fluoresceiny i ma lekko żółtawy odcień. Jest jeszcze „eozyna B”, która jest dibromo-dinitropochodną fluoresceiny i ma niebieskawy odcień.
ODCZYNNIKI:
– Fluoresceina 1,6 g
– Brom: 1,2 ml (= 3,6 g)
– Etanol bezwodny: 8 ml + niewielka ilość
– Na2CO3
WYKONANIE:
1. W kolbie stożkowej o poj. 100 ml umieszcza się fluoresceinę i dodaje etanol, po czym chwilkę miesza (*) (1).
2. Do powyższej mieszaniny dodaje się ostrożnie brom, najlepiej pipetą, mieszając zawartość kolbki (**).
3. Mieszaninę reakcyjną pozostawia się na kilka minut (***).
4. Wytrącony osad sączy się pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie przemywa trzykrotnie niewielką ilością oziębionego w lodzie etanolu.
5. Otrzymaną eozynę suszy się suszy się na powietrzu.
6. Wydajność 2,2 g (70 %).
Otrzymaną eozynę można przekształcić w rozpuszczalną w wodzie sól sodową:
7. Eozynę miesza się z roztworem Na2CO3; na każde 0,5 g eozyny należy użyć 0.1 g Na2CO3 rozpuszczonego w 1 ml wody (****).
8. Roztwór ogrzewa się chwilę na palniku, do momentu zaprzestania wydzielania się CO2OBSERWACJE:
(*) Następuje rozpuszczenie fluoresceiny, roztwór jest żółty.
(**) Zawartośc kolby przyjmuje zabarwienie intensywnie pomarańczowe od nadmiaru bromu.
(***) Po kilku minutach zachodzi reakcja i powstaje różowoczerwony barwnik, który wytrąca się w postaci osadu.
(****) Następuje zobojętnienie eozyny, czyli wytwarza się sól sodowa, która rozpuszcza się w wodzie.
UWAGI DOTYCZĄCE PRZEPROWADZENIA DOŚWIADCZENIA:
(1) Całą syntezę przeprowadza się pod dygestorium, w rękawiczkach gumowych i w okularach, szczególnie niezbędne są okulary i rękawiczki podczas pracy z bromem.
Źródło: znalezione w necie
